更新时间:2021-02-22 09:31:41
细胞代谢和代谢组学
Joshua D. Rabinowitz, PhD
Department of Chemistry, Princeton University
Princeton, NJ 08544 USA
同位素示踪剂是代谢研究中重要的工具。为了测定培养哺乳动物细胞内中心碳代谢途径代谢通量,我们向动物细胞培养基中添加D -葡萄糖(13C6, 99%) (CLM-1396)或L -谷氨酰胺(13C5, 99%) (CLM-1822)。细胞通过在同位素标记的培养基中进行培养,其代谢物可以通过用GC / MS或LC / MS进行检测。在传统研究中,葡萄糖通常被认为是许多细胞,特别是癌细胞的主要碳源。然而,最近的研究表明,谷氨酰胺通常在三羧酸(TCA)循环中起主导作用。谷氨酰胺对三羧酸循环中四碳化合物的作用,可以通过对苹果酸盐和天门冬氨酸标记来检测,而对三羧酸循环中二碳化合物的作用可以通过乙酰辅酶A和脂肪酸标记来检测。柠檬酸是一种信息非常丰富的分子,在三羧酸循环中它对二碳化合物以及四碳化合物都有相关作用。使用质谱等现代化的仪器,可以同时测量所有这些所有同位素标记的化合物,从而实现系统级通量定量。这些方法也可以应用于生物体内环境,在切除肿瘤或其他组织标本之前,给小鼠或患者注入同位素标记的营养素。代谢在生物工程和疾病病理生理学中具有非常总要的意思,也使得同位素在生物化学科学中的得到越来越广泛应用。
“我对我们从CIL获得的所有产品和服务非常满意。 所有稳定同位素试剂都超出了我们的预期。 我们还从CIL获得了定制服务,以完成一些非常具有挑战性的研究,并发现CIL灵活,愿意与我们合作,以实现我们的目标。 总之,关于我们在CIL及其产品方面的经验,我只有一些积极的事情要说。”
Matthew Steinhauser, MD
Brigham and Women’s Hospital
Harvard Medical School